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2025-04-16一、體外哺乳動物細(xì)胞染色體畸變試驗
結(jié)構(gòu)畸變:在細(xì)胞分裂的中期相階段,用顯微鏡檢出的染色體結(jié)構(gòu)改變,表現(xiàn)為缺失、斷片、互換等,可分為染色體型畸變和染色單體型畸變。
有絲分裂指數(shù):中期相細(xì)胞數(shù)與所觀察的細(xì)胞總數(shù)之比值,是反映細(xì)胞增殖程度的指標(biāo)。
二、試驗原理
在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條件下,使培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞暴露于受試物中。用中 期分裂相阻斷劑(如秋水仙素或秋水仙胺)處理,使細(xì)胞停止在中期分裂相,隨后收獲細(xì)胞,
制片,染色,分析染色體畸變。
三、受試物要求
固體受試物需溶解或懸浮于溶劑中。
液體受試物可直接加入試驗系統(tǒng)和/或用前稀釋至適合濃度。
四、測試方法
1.使用已建立的細(xì)胞株,如中國地鼠卵巢(CHO)細(xì)胞株或中國地鼠肺(CHL)細(xì)胞株。
2.設(shè)陽性對照物、陰性對照物和至少 3 個可供分析的受試物濃度組。
3.試驗前一天:細(xì)胞放CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
4.試驗時:加入受試物、S9 mix、培養(yǎng)液處理。
5.結(jié)束后:加入含10%胎牛血清的培養(yǎng)液處理,于24h內(nèi)收獲細(xì)胞。
6.空氣干燥或火焰干燥法制片常規(guī)制片處理,用姬姆薩染液染色。
7.對染色體畸變細(xì)胞率用X 2檢驗,以評價受試物的致突變性。
①陽性結(jié)果表明受試物引起培養(yǎng)的哺乳動物體細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)畸變。
②陰性結(jié)果表明在本試驗條件下,受試物不引起培養(yǎng)的哺乳動物體細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)畸變。
五、周期
檢測項目 | 測試周期(工作日) |
體外哺乳動物細(xì)胞染色體畸變試驗 | 73 |
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