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體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)
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  • 2025-04-16

一、體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)

正向突變:從原型至突變子型的基因突變,這種突變可引起酶和功能蛋白的改變。

突變頻率:所觀察到的突變細(xì)胞數(shù)與存活細(xì)胞數(shù)之比值。


二、試驗(yàn)原理

在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條件下,使細(xì)胞暴露于受試物一定時(shí)間,然后將細(xì)胞再傳代培養(yǎng)。胸苷激酶正常水平的細(xì)胞對(duì)三氟胸苷(trifluorothymidineTFT)等敏感,因而在培養(yǎng)液中不能生長(zhǎng)分裂,突變細(xì)胞則不敏感,在含有 6-硫代鳥(niǎo)嘌呤(6-thioguanine6-TG)、8-azaguanine (AG)TFT的選擇性培養(yǎng)液中能繼續(xù)分裂并形成集落。

基于突變集落數(shù),計(jì)算突變頻率以評(píng)價(jià)受試物的致突變性。


三、受試物要求

固體受試物需溶解或懸浮于溶劑中。

液體受試物可直接加入試驗(yàn)系統(tǒng)和/或用前稀釋至適合濃度。


四、測(cè)試方法

HPRT位點(diǎn)突變分析

TK位點(diǎn)突變分析(L5178Y 細(xì)胞,96 孔板法)


五、周期

檢測(cè)項(xiàng)目

測(cè)試周期(工作日)

體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變驗(yàn)

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